無細(xì)胞表達膜蛋白“叒”獲突破，SPR實測超高親和力！

更新時間：2025-11-14 點擊次數(shù)：177

在藥物開發(fā)領(lǐng)域，靶點膜蛋白制備一直是科研工作者面臨的重大挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)表達系統(tǒng)難以實現(xiàn)功能性膜蛋白的高效制備，嚴(yán)重制約了藥物開發(fā)進程。

近日，珀羅汀生物采用無細(xì)胞蛋白表達系統(tǒng)，成功制備出高活性人源SSTR2膜蛋白，經(jīng)表面等離子共振技術(shù)完成精準(zhǔn)親和力檢測，實測其對相應(yīng)抗體展現(xiàn)出超高親和力，KD值達0.649 nM！

SPR技術(shù)：分子互作檢測的"金標(biāo)準(zhǔn)"

表面等離子共振技術(shù)（SPR）作為無標(biāo)記、實時監(jiān)測生物分子相互作用的權(quán)-威方法，能夠精準(zhǔn)解析結(jié)合參數(shù)（ka、kd及KD值），提供分子互作的全面信息，被業(yè)界認(rèn)為親和力檢測的可靠技術(shù)平臺。

本次實驗以Tidutamab類似物（Human IgG1）作配體，將其捕獲在Protein A芯片，濃度為1 μg/mL。將分析物SSTR2膜蛋白稀釋為5個濃度梯度（12.5 nM ~200 nM），分別進行檢測。SSTR2膜蛋白由珀羅汀生物無細(xì)胞蛋白表達平臺制備，產(chǎn)品名稱：Human SSTR2 Full-Length Protein，產(chǎn)品編號：PLDP0047-1；運行試劑：1*PBS，0.05% DDM，0.01% CHS，pH 7.4。

珀羅汀膜蛋白產(chǎn)品目錄

SSTR2膜蛋白SDS-PAGE

經(jīng)親和力檢測以及動力學(xué)曲線擬合，SSTR2膜蛋白與Tidutamab類似物的親和力常數(shù)為0.649 nM。

無細(xì)胞表達技術(shù)：膜蛋白研究的利器

無細(xì)胞蛋白表達（CFPS）是一種體外直接合成蛋白質(zhì)的生物反應(yīng)。珀羅汀無細(xì)胞膜蛋白表達技術(shù)可控性、開放性高，可以在體系中直接添加去垢劑或納米盤，為膜蛋白提供類膜環(huán)境，從而實現(xiàn)全長膜蛋白可溶性表達。珀羅汀無細(xì)胞系統(tǒng)在合成膜蛋白時，無需細(xì)胞內(nèi)表達時復(fù)雜的靶向、插入、組裝過程，極大提高表達成功率。

無細(xì)胞+去垢劑表達體系特點：

規(guī)避毒性問題：無需維持細(xì)胞活力，可大量表達膜蛋白；

折疊環(huán)境可控：通過優(yōu)化去垢劑類型和濃度，為膜蛋白提供最適折疊環(huán)境。

無細(xì)胞+納米盤表達優(yōu)勢顯著：

模擬天然環(huán)境：在天然脂質(zhì)雙分子層中完成膜蛋白折疊；

功能更完整：更接近生理狀態(tài)下的構(gòu)象和活性。

本次實驗不僅驗證了無細(xì)胞表達技術(shù)制備高活性膜蛋白的可靠性，更彰顯了“無細(xì)胞表達+SPR檢測"組合在膜蛋白研究與藥物開發(fā)中的重要價值：無細(xì)胞表達極大提高膜蛋白表達成功率，所得膜蛋白抗原表位完整；SPR提供全親和力參數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確可信。

“無細(xì)胞表達+SPR檢測"的新組合將為膜蛋白研究帶來革命性突破！